ВЗЯТИЕ КРОВИ

Для исследования крови на общий клинический анализ кровь берут из пальца обычно утром, желательно до физической нагрузки и различных диагностических процедур. Некоторые авторы рекомендуют для избежания пищеварительного лейкоцитоза брать кровь натощак, хотя это представляется и нестрого обязательным.

Реактивы.

1.   5% раствор трехзамещенного цитрата натрия; хранят 1—2 нед, при помутнении негоден.

2.  Трансформирующий раствор:

•     ацетонциангидрин                           0,5 мг
•     калий железо-синеродистый      0,2 г
•     калий железо-синеродистый      0,2 г
•     натрия гидрокарбонат                   0,2 г
•     натрия гидрокарбонат                   0,2 г
•     дистиллированная вода               1 г

Раствор желтого цвета, прозрачный.
При обесцвечивании или появлении осадка непригоден.
Стабилен - в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла при комнатной температуре

3.  0,9 % раствор хлорида натрия или раствор Гайема:

•      ртуть хлористая         0,5 г,
•      натрия сульфат          5 г,
•      натрия хлорид             1 г,
•      вода дистиллированная до 200 мл.

4.  3-5 % раствор уксусной кислоты.

5.  Спирт.

6.  Йод.

Оборудование.

1. Копье для укола пальца (необходимо стерилизовать сухим жаром в течение 1 ч при 160 °С или автоклавированием в течение 30 мин при 1,5 атм или кипячением не менее 30 мин).
2. Пробирки.
3. Пипетки вместимостью 0,02 мл (стерильные).
4. Капилляры от аппарата Панченкова (стерильные).
5. Пипетки вместимостью 5 и 1 мл (для разводящих жидкостей) или бюретки.
6. Предметные стекла, шлифованные стекла.

Способ взятия крови .

1.  Заранее наливают в пробирки соответствующие реактивы:

• для определения СОЭ — в капилляр Панченкова набирают (до метки 0,75)  5% раствор трехзамещенного цитрата натрия;
• для определения концентрации гемоглобина — 5 мл трансформирующего раствора;
• для подсчета числа эритроцитов — 4 мл реактива   0,9 % раствор хлорида натрия или раствор Гайема,
• для подсчета числа лейкоцитов — 0,4 мл  3—5 % раствора уксусной кислоты.

2.  Тщательно протерев кожу мякоти пальца (лучше IV пальца) ватным шариком, смоченным спиртом, делают укол индивидуальным стерильным копьем до упора.

3.  Первую выступившую каплю крови вытирают, из следующих капель крови, выступающих из мест укола при легком надавливании, быстро набирают необходимое количество крови. Начинают взятие обычно с разведения крови для определения СОЭ, так как для этого исследования требуется наибольшее количество крови.

Для определения СОЭ в капилляр от аппарата Панченкова, промытый в  5% растворе трехзамещенного цитрата натрия, набирают кровь до метки 0 (100 делений) и тщательно выдувают ее в пробирку с подготовленным раствором цитрата натрия (соотношение при этом крови и реактива 4:1), пробирку, встряхивают. Мякоть пальца вытирают сухим ватным шариком и после надавливания собирают выступившую каплю крови.

Для определения концентрации гемоглобина в сухую стерильную пипетку вместимостью 0,02 мл набирают кровь до метки, выдувают ее в пробирку с трансформирующим раствором и несколько раз ополаскивают пипетку в этом растворе, заполняя ее и выдувая раствор. Снова вытирают место укола и выдавливают свежую каплю крови.

Для подсчета числа эритроцитов кровь берут в количестве 0,02 мл в пипетку и выдувают в пробирку с  0,9 % раствор хлорида натрия или раствором Гайема. Применявшиеся ранее смесители (меланжеры) для взятия крови с целью подсчета эритроцитов и лейкоцитов в настоящее время заменены пробирочным методом, так как он точнее, проще и удобнее при мытье посуды.
В целях более точного разведения крови (в 200 раз) пипетку после выдувания крови несколько раз промывают раствором, находящимся в пробирке.

Для подсчета лейкоцитов кровь берут пипеткой до метки (0,02 мл) и выдувают ее в пробирку с 3-5 % раствором уксусной кислоты, промывают несколько раз в растворе уксусной кислоты (разведение крови в 20 раз). Для взятия крови у одного пациента можно пользоваться одной пипеткой вместимостью 0,02 мл, но обязательно набирать кровь для лейкоцитов в последнюю очередь (так как уксусная кислота гемолизирует эритроциты).

Для исследования лейкоцитарной формулы, морфологии эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов готовят мазки крови: вытирают место укола сухим шариком ваты и наносят каплю крови на сухое обезжиренное предметное стекло, затем .быстро готовят тонкие мазки с помощью шлифованного стекла, краем которого быстрым движением продвигают по предметному стеклу каплю крови (см. 3.3.2).

Для профилактики сывороточного гепатита запрещается брать кровь одной микропипеткой у нескольких лиц. При недостаточном количестве микропипеток рекомендуется применять часовые стекла или лунки, при этом у каждого пациента кровь берут стерильным индивидуальным капилляром от аппарата Панченкова, помещают в часовое стекло или лунку, из которых быстро набирают кровь для соответствующего разведения, необходимого для того или иного исследования.

В настоящее время в связи с появлением гематологических автоматов стали шире использовать для общего клинического анализа венозную кровь. Кровь из вены берут либо в специальные пластиковые пробирки одноразового пользования с порошком ЭДТА, либо в стеклянные пробирки с другим антикоагулянтом. Необходимо тотчас после взятия крови закрыть пробирку пробкой и несколько раз тщательно перемешать кровь, не взбалтывая ее (опрокидывая пробирку сначала пробкой вниз, затем пробкой вверх). Тщательное перемешивание крови позволяет избежать образования сгустков, наличие которых искажает результаты исследования.

Литература.

• Бейер Б. А. Краткое пособие по гематологии, 2-е изд.— Л., 1967, с. 219;
• Приказ Министерства здравоохранения СССР № 300 от 08.04.77 г.