Альфа-фетопротеин

Двухмерная иммунодиффузия в геле.

Принцип и возможности метода.

Исследуемые объекты, содержащие антигены и антитела, помещенные в гель, диффундируют в его толще и, взаимодействуя друг с другом, образуют в зоне эквивалентных количественных соотношении преципитаты (см. рис.)

Метод обладает высокой специфичностью, чувствительностью и разрешающей способностью. Простота исполнения метода позволяет воспроизвести его в любых лабораториях. Двухмерная иммунодиффузия в геле позволяет не только изучить композицию биологических материалов, но и качественно и количественно охарактеризовать примеси в высокоочищенных (с химической точки зрения) препаратах. Используя возможности качественного анализа метода, можно выявить минимальные антигенные различия двух сравниваемых систем (например. появление в сыворотке или экскретах больных белков с измененными антигенными свойствами). Характеризуя количественные стороны компонентов системы, метод позволяет произвести расчеты эквивалентных соотношений антигена и антител, без чего невозможен квалифицированный анализ специфически взаимодействующих белковых компонентов во всех методах, в основе которых лежит феномен преципитации: от одномерной диффузии в геле до радиоиммунологического анализа.

Рисунок. Схема постановки метода двойной диффузии в геле для определения a-фетопротеина.

a - схема стандартного штампа: диаметр переферических лунок 4 мм, радиус центральной лунки 9 мм; б- типы реакций; в- схема постановки опыта: АТ - кроличья моноспецифическая антисыворотка против a-фетопротеина человека; АГ  ѕ a-фетопротеина; 1, 2, 3, 4  - испытуемые сыворотка; ИР  - изотонический раствор хлорида натрия.