Исследование морфологии эритроцитов

Принцип
Специальное оборудование
Реактивы
Ход исследования
Клиническое значение
Литература
Характеристика эритроцитов при некоторых формах анемий

Принцип

Исследование окрашенных мазков крови с помощью иммерсионной системы микроскопа.

Специальное оборудование

Микроскоп.

Реактивы

1. Иммерсионное масло.
2. Диэтиловый эфир.

Ход исследования

Приготовление мазков крови унифицированным методом (1979). Предметное стекло с окрашенным, высохшим на воздухе мазком крови помещают на столик микроскопа и с помощью малого увеличения (окуляр 7Х, объектив 8Х ) находят край мазка. Не меняя положения стекла, наносят каплю иммерсионного масла на край мазка на место, расположенное под объективом. Переводят иммерсионный объектив в положение, вертикальное к мазку, при этом объектив погружается в каплю масла.

Осторожно слегка вращают макровинт до появления изображения в поле зрения микроскопа. Затем с помощью микровинта устанавливают четкую видимость препарата (критерием правильно подобранного для каждого глаза фокусного расстояния будет ясное изображение клеток с четкими границами и внутриклеточной структурой). После установки микроскопа приступают к исследованию морфологии эритроцитов, обращая внимание на форму, размеры клеток, интенсивность их окраски, наличие внутриклеточных включений и пр. Поскольку клетки имеют определенный объем, для лучшего их рассмотрения надо постоянно менять фокусное расстояние с помощью микровинта.

Для получения полного представления о морфологии эритроцитов необходимо просмотреть несколько полей зрения, передвигая мазок либо рукой, либо с помощью крестообразного устройства. Рассматривать морфологию эритроцитов надо только в тонких местах мазка, где эритроциты расположены одиночно, не образуют «монетных столбиков».

По окончании микроскопии с помощью макровинта поднимают тубус микроскопа, снимают стекло с предметного стекла, стирают масло с иммерсионного объектива и предметного стекла марлей, смоченной эфиром.

У здоровых людей эритроциты имеют примерно одинаковый размер. Для более точного представления о размере клеток проводят эритроцитометрию — измерение диаметра эритроцитов (см. 3.3.3). Эритроцит имеет форму двояковогнутого диска. В окрашенных препаратах эритроциты круглой формы, розового цвета. Оксифилия клетки обусловлена присутствием гемоглобина, поэтому по интенсивности окраски можно судить о степени насыщенности эритроцитов гемоглобином. Эритроциты здоровых людей имеют равномерную окраску и небольшое просветление в центре (нормохромия).

Клиническое значение

Изменения морфологии эритроцитов в виде появления эритроцитов разного размера (анизоцитоз), разной формы (пойкилоцитоз), разной окраски (анизохромия) являются важными морфологическими симптомами различных форм анемии.

Наиболее часто наблюдается бледная окраска эритроцитов с более широкой неокрашенной центральной частью — гипохромия эритроцитов, которая обусловлена низким насыщением эритроцита гемоглобином и характерна для распространенных форм малокровия, связанных с дефицитом железа (постгеморрагические анемии, анемии беременных, при опухолях, сепсисе и других тяжелых инфекционных заболеваниях, заболеваниях желудочно-кишечного тракта и пр.). При этом гипохромия, как правило, сочетается с уменьшением размера эритроцитов - микроцитозом (см. табл.). Гипохромия эритроцитов сопутствует и более редким формам малокровия, не связанным с дефицитом железа; свинцовому отравлению, талассемии и другим наследственным повреждениям эритроцитов. Следует иметь в виду, что гипохромия эритроцитов может наблюдаться не только при снижении концентрации гемоглобина и числа эритроцитов в крови, но и при нормальных количественных показателях. Реже встречается усиленная окраска эритроцитов — гиперхромия, связанная с повышенным насыщением эритроцитов гемоглобином и сочетающаяся с увеличенным их размером — макроцитозом, мегалоцитозом. Эти изменения эритроцитов характерны для дефицита таких факторов кроветворения, как витамин B₁₂, фолиевая кислота, и наблюдаются при анемии Аддисона — Бирмера, дифиллоботриозе, органических заболеваниях желудка, кишечника, алкоголизме, беременности и др.

Изменение окраски в виде полихроматофилии (эритроциты сероватого цвета) обусловлено окраской кислыми и основными красителями. В норме встречаются единичные полихроматофильные эритроциты. Их число повышается при усиленном эритропоэзе (постгеморрагические анемии, гемолитические анемии и др.).

При талассемии и других формах малокровия встречаются так называемые мишеневидные эритроциты — с окрашенным участком в центре клетки на фоне неокрашенной зоны.

Появление базофильной пунктации в эритроцитах связано с патологическим кроветворением и характерно для свинцового отравления, но встречается при других формах анемии. Эритроциты с ядром — нормобласты, эритробласты — встречаются в мазках крови при различных анемиях. Большое количество нормобластов характерно для гемолитических анемий, метаста-зов опухоли в костный мозг. Гигантские ядерные эритроциты — мегалобласты — свидетельствуют о патологическом кроветворении, связанном с дефицитом витамина B₁₂, фолиевой кислоты. При этих же состояниях наблюдаются и эритроциты с остатками ядер — кольца Кебота, тельца Жолли. Последние формы постоянно обнаруживают в мазках крови у больных после удаления селезенки.

Шаровидная форма эритроцитов, отличающаяся уменьшенным диаметром и интенсивной без просветлении окраской, — микросфероцитоз — является патогномоничным морфологическим признаком гемолитической анемии — наследственного микросфероцитоза (см. табл.). В небольшом количестве микросфероциты могут встречаться и при других гемолитических анемиях.

Большое диагностическое значение имеет обнаружение в мазках крови эритроцитов серповидной формы. Этот симптом характерен для серповидноклеточной анемии, относящейся к группе наследственных гемоглобинопатий (S-гемоглобиноз).

В сомнительных случаях, когда число серповидных эритроцитов в мазках невелико, следует проводить пробы на серповидность эритроцитов, основанные на использовании веществ (метабисульфит натрия, янусовый зеленый, метиленовый синий), понижающих содержание кислорода в препаратах.

На стекле смешивают каплю крови и каплю одного из указанных веществ, надрывают покровным стеклом. Просматривают под микроскопом через 10—15 мин, затем 24—48 ч. В положительных случаях в препаратах количество эритроцитов серповидной формы увеличивается.

Литература

Циркина А. С.—В кн.: Справочник по клиническим лабораторным методам исследования/Под ред. Е. А. Кост. 2-е изд.— М.: Медицина, 1975, с. 17.